Wykrywanie immunohistochemiczne i analiza immunochemiczna degradacji kolagenu typu II w chrząstkach stawowych normalnych, reumatoidalnych i chrzęstno-stawowych u ludzi oraz w eksplantatach chrząstki stawowej bydła hodowanych z interleukiną 1.

Zniszczenie chrząstki stawowej i utrata funkcji w chorobach stawów obejmuje degradację proteolityczną macierzy tkanki łącznej. Zbadaliśmy degradację kolagenu chrząstki poprzez opracowanie metod immunochemicznych, które umożliwiają identyfikację i analizę degradacji kolagenu typu II in situ. Wcześniej nie istniała technika specyficznego rozpoznawania degradacji kolagenu typu II in situ w chrząstce stawowej. W metodach tych wykorzystuje się poliklonalną surowicę odpornościową (R181), która specyficznie reaguje z niezwiązanymi łańcuchami alfa i peptydami pochodnymi CNBr, alfa (II) CB11 i alfa (II) CB8 kolagenu ludzkiego i bydlęcego typu II. Podejście eksperymentalne opiera się na fakcie, że gdy fibrylacyjne kolageny są rozszczepiane, spiralna cząsteczka kolagenu rozwija się, odsłaniając ukryte epitopy. Tutaj pokazujemy zastosowanie R181 w badaniu degradacji kolagenu typu II w chrząstce stawowej bydła, która została hodowana z lub bez IL-1 oraz w normalnych ludzkich, reumatoidalnych i chrzęstno-stawowych chrząstkach stawowych. W porównaniu z chrząstkami świeżo izolowanymi lub hodowanymi bez IL-1 chrząstka bydlęca hodowana z IL-1 przez 3-5 dni wykazała wzrost zarówno barwienia immunocytochemicznego międzykomórkowego, jak i międzykomórkowego. Ekstrakty z tych chrząstek zawierały łańcuchy alfa kolagenu typu II, które zwiększono w ilości po hodowli z IL-1 przez 11 dni. Ponadto hodowla z IL-1 spowodowała pojawienie się fragmentów łańcucha alfa o niższej masie cząsteczkowej. Wszystkie badane tkanki ludzkiej artretyczne wykazywały obszary wyraźnego barwienia okołórkowego i terytorialnego w celu degradacji kolagenu w porównaniu z tkankami nie chorej, co wskazuje, że chondrocyty są częściowo odpowiedzialne za tę degradację w porównaniu z chłonnymi tkankami. W większości przypadków chrząstka reumatoidalna była zabarwiona najintensywniej na powierzchni stawowej oraz w strefie głębokiej i środkowej, podczas gdy chrząstka osteoarthrytyczna zwykle bardziej zabarwiła powierzchownie i strefy środkowe, ale mniej intensywnie. Wyraźne wzory miejsc degradacji kolagenu odzwierciedlają różnice w destrukcji kolagenu w tych chorobach, co sugeruje możliwe różne źródła aktywacji chondrocytów. Te eksperymenty demonstrują zastosowanie immunologicznych metod do wykrywania degradacji kolagenu i demonstrują wzrost degradacji kolagenu w ludzkich artrytydach i w żywej chrząstce bydlęcej traktowanej IL-1.
[przypisy: suszone pomidory przepisy, czy magia istnieje naprawdę, magia istnieje ]
[patrz też: magia istnieje, czy hogwart istnieje, czy istnieje magia ]