Wpływ leczenia trombiną preparatów czynnika VIII i małego aktywnego fragmentu związanego z Ca2 +.

Gdy preparaty ludzkiego, psiego lub bydlęcego czynnika VIII poddaje się chromatografii na 4% agarozie przy sile jonowej 0,2, aktywność czynnika VIII wymywa się jako pojedynczy pik w objętości pustej przestrzeni z nieznacznym ogonem. Inkubacja takich preparatów z rozcieńczoną (0,01 U / ml) wysoce oczyszczoną trombiną powoduje pewną aktywację czynnika VIII. Chromatografia takich mieszanin inkubacyjnych, w tych samych warunkach jak poprzednio, powoduje wymywanie dwóch szczytów aktywności czynnika VIII w objętości pustej przestrzeni i jedno znacznie później z wyraźnym ogonem. Szczyt objętości pustki ma większość białka i pewną aktywność czynnika VIII. Te puste objętościowe frakcje zawierają również całą aktywność czynnika von Willebranda preparatów bydlęcych traktowanych trombiną. Dłuższe leczenie trombiną lub leczenie silniejszą trombiną wydaje się przesuwać o wiele więcej aktywności prokoagulacyjnej na później wymywany pik. Ponadto, gdy pik aktywności czynnika VIII, znaleziony w objętości pustej przestrzeni po leczeniu trombiną, ponownie inkubowano z rozcieńczoną trombiną, nastąpił wzrost aktywności czynnika VIII. Chromatografia tej mieszaniny inkubacyjnej wykazała jedynie niewielką aktywność w objętości pustej przestrzeni, podczas gdy większość aktywności występowała w drugim piku. Z drugiej strony, traktowanie trombiną aktywności czynnika VIII w piku 2 powodowało gwałtowny spadek aktywności zamiast dalszego wzrostu. Proponuje się, aby resztkowa aktywność czynnika VIII znajdująca się w pustej przestrzeni reprezentowała nieprzereagowany czynnik VIII, podczas gdy pik późnego wymywania reprezentował materiał aktywowany trombiną, który ma mniejszą pozorną wielkość. Późny wymywany pik różni się od małego czynnego fragmentu czynnika VIII uzyskanego przez dysocjację Ca2 +, ponieważ ten ostatni może być aktywowany przez trombinę. Podobny zestaw eksperymentów przeprowadzono przy użyciu ultracentwugacji bydlęcych preparatów czynnika VIII na gradientach gęstości sacharozy. Wyniki tych eksperymentów całkowicie zgadzały się z wynikami uzyskanymi za pomocą chromatografii get . Preparaty wykonane z ludzkiej hemofilnej osocza, według procedury stosowanej do oczyszczania ludzkiego czynnika VIII, inkubowano również z trombiną i chromatografowano. Czynnik von Willebranda ponownie znaleziono tylko w pustych frakcjach objętościowych, ale nie było aktywności czynnika VIII w eluowanych frakcjach. W innych doświadczeniach kontrolnych aktywowane i nieaktywowane frakcje czynnika VIII nie skrzepły z fibrynogenem i nie zawierały oznaczalnego czynnika IX ani X. Mały czynnik VIII o zmodyfikowanej trombinie był inaktywowany przez naturalnie występujący ludzki inhibitor czynnika VIII i frakcji gamma-globuliny. surowice odpornościowe królika wytworzone przeciwko zdysocjowanemu wapniowo małemu aktywnemu fragmentowi czynnika VIII.
[przypisy: czy magia istnieje, czy hogwart istnieje, jak być duszą towarzystwa ]
[hasła pokrewne: lakiery do paznokci inglot, bajki terapeutyczne dla dzieci, znieczulenie ogólne powikłania ]