Ugrupowanie węglowodanowe czynnika von Willebranda nie jest konieczne do utrzymania struktury multimerycznej i aktywności kofaktora rystocetyny, ale chroni przed degradacją proteolityczną.

Aby lepiej zdefiniować rolę węglowodanów w strukturze i aktywność kofaktora ristocetyny czynnika von Willebranda, usunęliśmy do 83% całkowitej heksozy poprzez sekwencyjne traktowanie cząsteczki endo-beta-N-acetylo-glukozoaminidazą F (endo F) , neuraminidaza i beta-galaktozydaza. Sam Endo F usuwał 69% całkowitej heksozy i D-galaktozy i 71% kwasu sialowego. Jednakże nie było zauważalnej utraty dużych multimerów, a aktywność kofaktora rystocetyny została zmniejszona tylko o 11%. Zredukowana podjednostka czynnika von Willebranda migruje szybciej w żelach poliakrylamidowych zawierających SDS, co odpowiada 10% spadkowi masy cząsteczkowej. Wszystkie multimery nieredukowanego, modyfikowanego węglowodanowo czynnika von Willebranda migrowały szybciej w SDS-agarozie, ale wzór trypletowy poszczególnych multimerów pozostał niezmieniony. Ta zmiana szybkości migracji multimerów nie przypominała dotychczasowych zmian w wariantach choroby von Willebranda. Dalsze traktowanie czynnika von Willebranda neuraminidazą i beta-galaktozydazą zredukowało D-galaktozę do 15%, a aktywność kofaktora rystocetyny do 57%. Podobny spadek aktywności kofaktora rystocetyny obserwowano, gdy czynnik von Willebranda był leczony tylko neuraminidazą i beta-galaktozydazą. Natomiast leczenie czynnika von Willebranda neuraminidazą i beta-galaktozydazą w obecności inhibitorów proteazy (20 mM benzamidyny, 20 U / ml aprotoniny, 15 mikrogramów / ml leupeptyny) spowodowało porównywalne usunięcie węglowodanów bez zmiany aktywności kofaktora rystocetyny . Co więcej, struktura multimeryczna pozostała nienaruszona pomimo usunięcia w 80% D-galaktozy. Sugerowało to, że węglowodan chronił czynnik von Willebranda przed śladami jednego lub więcej zanieczyszczeń proteazowych. Dowody na poparcie tej hipotezy uzyskano eksponując czynnik von Willebranda na plazminę po wstępnym leczeniu samą neuraminidazą lub neuraminidazą i beta-galaktozydazą. Utratę dużych multimerów obserwowano z czynnika von Willebranda, który był wcześniej leczony neuraminidazą, ale było to nawet większe, jeśli wstępne leczenie było również związane z beta-galaktozydazą. W przeciwieństwie do tego, struktura multimeryczna czynnika von Willebranda z nienaruszonym węglowodanem nie była pod wpływem plazmin w podobnych warunkach. Badania te sugerują, że węglowodany chronią czynnik von Willebranda przed dezagregacją występującą wtórnie do ataku proteolitycznego, ale nie odgrywają bezpośredniej roli w utrzymywaniu jego struktury multimerycznej lub aktywności kofaktora rystocetyny.
[podobne: pogotowie opiekuńcze lublin, lęk przed jazdą samochodem, lakiery do paznokci inglot ]
[więcej w: dawca komórek macierzystych, lekarz medycyny pracy warszawa nfz, trening ogólnorozwojowy na siłowni ]