Biosynteza kwasu cholowego: WADA ENZYMATYCZNA W CEREBROTENDYJNEJ XANTHOMATOZIE

Biosynteza kwasu cholowego jest wadliwa u osobników z mózgowo-rdzeniową żółtaczką (CTX) i jest związana z wydalaniem 5 (3 -cholestan-3 [3, 7a, 12a, 25-tetrolu, związku pośredniego na szlaku 25-hydroksylacji kwasu cholowego w CTX. Aby zdefiniować defekt enzymatyczny w CTX, dwa podejrzane prekursory kwasu cholowego, a mianowicie 5a – [7 (3 -3H] cholestan-3 (3, 7 [3, 12 (3-triol i 5a [24-14C] cholestan-3. 7, 12, 24S, 25-pentol badano zarówno w doświadczeniach in vivo, jak i in vitro. Trzeci prekursor, 5a – [7 a-3H] -cholestan-3 (3, 7a, 12a, 25-tetrol, porównano z nimi in vitro. W doświadczeniach in vivo każdy ze znakowanych prekursorów podawano dożylnie dwóm CTX i dwóm osobnikom kontrolnym. Continue reading „Biosynteza kwasu cholowego: WADA ENZYMATYCZNA W CEREBROTENDYJNEJ XANTHOMATOZIE”

Charakterystyka antygenów z nietypowych Haemophilus influenzae rozpoznawanych przez ludzkie przeciwciała bakteriobójcze. Rola białek błony komórkowej Haemophilus.

Główne antygeny błony zewnętrznej, białka i lipopolisacharydy (LPS), z nietypowych Haemophilus influenzae, scharakteryzowano i zbadano jako cele dla ludzkich przeciwciał bakteriobójczych zależnych od dopełniacza. Zewnętrzne błony z dwóch nietypowych izolatów H. influenzae, które powodowały zapalenie ucha środkowego i zapalenie płuc (ucha środkowego i aspiracje poprzeczne) zostały przygotowane przez strzyżenie drobnoustrojów w EDTA. Membrany te porównano z membranami otrzymanymi niezależnie przez obróbkę sferoplastów i lizozymem całych komórek i stwierdzono, że mają one: podobny układ elektroforezy w żelu z dodecylosiarczanem-poliakryloamidem (SDS-PAGE) białek; identyczne gęstości (rho = 1,22 g / cm3); i minimalna aktywność dehydrogenazy d-laktozy, co wskazuje na czystość z błon cytoplazmatycznych. Błonę zewnętrzną solubilizowano w buforze dezagregacji LPS i białka oddzielono od LPS metodą chromatografii na sita molekularnego. Continue reading „Charakterystyka antygenów z nietypowych Haemophilus influenzae rozpoznawanych przez ludzkie przeciwciała bakteriobójcze. Rola białek błony komórkowej Haemophilus.”

Proksymalna reabsorpcja w kanalikach dwuwęglanów i PCO2 w przewlekłej alkalozie metabolicznej u szczurów.

Podjęto badania w celu określenia schematu reabsorpcji proksymalnego kanalikowego dwuwęglanu i jego związku z rurkowym i kapilarnym PCO2 u szczurów z przewlekłą alkalozą metaboliczną (CMA). CMA indukowano przez podawanie furosemidu szczurom spożywającym dietę o niskiej elektrolitowej suplementacji NaHCO3 i KHCO3. Proksymalną reabsorpcję wodorowęglanu dwuwęglowego i PCO2 mierzono na szczurach CMA 4-7 lub 11-14 dni po iniekcji furosemidu, w celu zbadania szerokiego zakresu przefiltrowanych ilości wodorowęglanów. Grupę dziewięciu dobranych pod względem wieku zwierząt kontrolnych, karmionych tą samą dietą, ale nie otrzymujących furosemidu, badano dla porównania. W trzeciej grupie kontroli przefiltrowany ładunek wodorowęglanu był zmieniany w tym samym zakresie, co u szczurów z CMA, poprzez wlew plazmy i zwężenie aorty. Continue reading „Proksymalna reabsorpcja w kanalikach dwuwęglanów i PCO2 w przewlekłej alkalozie metabolicznej u szczurów.”

Synergistyczne interakcje przyrostów fizjologicznych glukagonu, epinefryny i kortyzolu u psa: MODEL PODWYŻSZONEGO NACISKIEM HYPERGLYCEMIA

Aby ocenić rolę działań anty-insuliny hormonalnej i interakcji w patogenezie hiperglikemii wywołanej stresem, hormony przeciwregulacyjne, glukagon, epinefryna i kortyzol były podawane same, jak również w podwójnych i potrójnych kombinacjach do zdrowych, świadomych psów w dawkach, które były Zaprojektowany do symulowania zmian obserwowanych przy dużym obciążeniu. Infuzja samego glukagonu, epinefryny lub kortyzolu powodowała jedynie nieznaczne lub nieznaczne zwiększenie stężenia glukozy w osoczu. Przeciwnie, wzrost stężenia glukozy w osoczu wytwarzany przez skojarzony wlew dwóch dowolnych hormonów przeciwregulacyjnych był o 50-215% większy (p <0,005-0,001) niż suma odpowiednich poszczególnych wlewów. Ponadto, gdy wszystkie trzy hormony były podawane jednocześnie, wzrost stężenia glukozy w osoczu (144 . 2 mg / dl) był dwa do czterokrotnie większy niż suma odpowiedzi na poszczególne infuzje hormonalne lub suma kombinacji podwójnego plusa pojedynczy wlew hormonu (P <0,001). Continue reading „Synergistyczne interakcje przyrostów fizjologicznych glukagonu, epinefryny i kortyzolu u psa: MODEL PODWYŻSZONEGO NACISKIEM HYPERGLYCEMIA”

Niektóre efekty wapnia na aktywację ludzkiego czynnika VIII / Von Willebrand Factor Protein przez trombinę

Gdy białko czynnik VIII / czynnik von Willebranda (FVIII / vWF) poddaje się ponownemu chromato- grafowaniu na 4% agarozie w 0,25 M CaCl2, aktywność białka i vWF pojawia się w objętości pustej przestrzeni, ale większa część aktywności prokoagulacyjnej FVIII wypada później. Ostatnie dowody sugerują, że opóźniona aktywność prokoagulacyjna czynnika VIII to proteolitycznie zmodyfikowana postać białka FVIII / vWF, która filtruje anomalnie z agarozy w 0,25 M CaCl2. Aby sprawdzić, czy trombina jest zaangażowana w proteazę, zbadano wpływ 0,25 M CaCl2 na FVIII / vWF i jego reakcję z trombiną. Około 30% aktywności prokoagulacyjnej FVIII zostało natychmiast utracone, gdy roztwory białka FVIII / vWF wytworzono w CaCl2 0,25 M. Gdy FVIII w 0,15 M NaCl aktywowano za pomocą 0,04 U trombiny / ml, a następnie uzyskano 0,25 M w CaCl2, aktywność prokoagulacyjna o szerokim zakresie stężenia białka FVIII / vWF pozostawała aktywowana przez co najmniej 6 godzin. Continue reading „Niektóre efekty wapnia na aktywację ludzkiego czynnika VIII / Von Willebrand Factor Protein przez trombinę”

Dietetyczny olej z menhadenu obniża stężenie prostaglandyn w osoczu i wapnia u myszy z włókniakomięsakiem HSDM1 wytwarzającym prostaglandynę.

Wykazano, że wielonienasycone kwasy tłuszczowe omega 3, szczególnie kwas eikozapentaenowy (EPA, 20: 5), zmieniają metabolizm kwasu arachidonowego (20: 4) zarówno w układach in vitro, jak i in vivo. Aby dokładniej zbadać rolę konwersji kwasu arachidonowego w prostaglandynach (PG) u myszy hiperkalcemicznych niosących włókniakomięsak HSDM1 produkujący PG, przeprowadziliśmy doświadczenia, w których zwierzętom kontrolnym i zwierzętom z nowotworem karmiono diety niską (0,1-0,2% całkowitej zawartości tłuszczów). kwas) lub wysoki (17%) w EPA. We wszystkich pięciu przeprowadzonych doświadczeniach, myszy z nowotworem, odżywiające się dietą kontrolną, znacznie wzrosły (średnio sześciokrotnie powyżej kontroli) stężenia 13,14-dihydro-15-keto-PGE2 (PGE2-M) w osoczu, podczas gdy u myszy z guzami HSDM1 i jedzącymi wzbogacona w EPA dieta z olejkiem z menhadenu, elewacja została zredukowana do zaledwie dwóch wartości kontrolnych. Zwiększenie stężenia wapnia w osoczu (około 2,5 mg / dl powyżej kontroli) u zwierząt z nowotworem również było znacząco zmniejszone (P poniżej 0,05) do jedynie 1,3 mg / dl powyżej kontroli u myszy spożywających dietę wzbogaconą w EPA. Continue reading „Dietetyczny olej z menhadenu obniża stężenie prostaglandyn w osoczu i wapnia u myszy z włókniakomięsakiem HSDM1 wytwarzającym prostaglandynę.”

Zwiększone przyleganie erytrocytów ludzkich z zakrzepłą krwią i fosfatydyloseryną do hodowanych ludzkich monocytów krwi obwodowej.

Dokładny mechanizm usuwania sierpowatych erytrocytów (RBC) z krążenia jest kontrowersyjny, chociaż możliwe jest, że zwiększone rozpoznanie tych komórek przez krążenie jednojądrzastych fagocytów może przyczynić się do tego procesu. Zbadaliśmy tę możliwość przez oddziaływanie komórek sierpowatych z hodowanymi ludzkimi monocytami krwi obwodowej. Nasze wyniki pokazują, że zarówno nieodwracalnie sierpowate komórki (ISC), jak i odtlenione odwracalnie sierpowate komórki (RSC) miały wyższą awidność przy przyleganiu do monocytów niż natleniony sierp i normalny RBC. ISC były najbardziej adherentnym typem komórek. Stwierdzono, że przyleganie RSC do monocytów jest odwracalne; reoksygenacja odtlenionego RSC spowodowała znaczący spadek przylegania RSC do monocytów. Continue reading „Zwiększone przyleganie erytrocytów ludzkich z zakrzepłą krwią i fosfatydyloseryną do hodowanych ludzkich monocytów krwi obwodowej.”

Indukcja nefropatii błonowej u królików poprzez podawanie egzogennego antygenu kationowego: DEMONSTRACJA ROLI PATOGENICZNEJ NA OPŁATY ELEKTRYCZNE

Badaliśmy rolę antygenowego ładunku elektrycznego jako determinanty lokalizacji kłębuszkowego układu immunologicznego u królika. Zapalenie nerek wywołane przez nudności w surowicy było indukowane w grupach białych królików nowozelandzkich przez codzienne 25-mg dożylne iniekcje bydlęcej albuminy surowicy (BSA) chemicznie zmodyfikowane, aby były kationowe (pI> 9,5) lub bardziej anionowe (pI, 3,5-4,6); dodatkowa grupa otrzymywała niezmodyfikowaną natywną BSA (pI, 4,5-5.1). Analizowano czynniki, o których wiadomo, że wpływają na lokalizację kompleksu immunologicznego, np. Wielkość cząsteczkową podawanego antygenu i wynikające z niego krążące kompleksy immunologiczne, immunogenność i czas zniknięcia z krążenia i stwierdzono, że są one podobne zarówno dla anionowego, jak i kationowego BSA. Modyfikacja ładunku zwiększyła nieimmunologiczny klirens kationowego i anionowego BSA w porównaniu z natywnym BSA. Continue reading „Indukcja nefropatii błonowej u królików poprzez podawanie egzogennego antygenu kationowego: DEMONSTRACJA ROLI PATOGENICZNEJ NA OPŁATY ELEKTRYCZNE”

Metabolizm hormonu przytarczycznego przez wyizolowane komórki szczurzego Kupffera i komórki hepatocytów

Dane z kilku laboratoriów wskazują, że mechanizmy wątrobowe mogą odgrywać odrębną rolę w metabolizmie nienaruszonego hormonu po sekrecji, który to proces odpowiada, przynajmniej częściowo, za heterogeniczność krążącego hormonu przytarczycznego. W związku z tym zbadaliśmy proteolizę nienaruszonego hormonu przez izolowane szczurze komórki Kupffera i hepatocyty. Komórki Kupffera (106 komórek / ml) i hepatocyty (107 komórek / ml) inkubowano z nieznakowanym i znakowanym 125I parathormonem bydlęcym w 37 ° C przez okres do 2 godzin. Po inkubacji z komórkami Kupffera, nienaruszony hormon zniknął z at. z 12. Continue reading „Metabolizm hormonu przytarczycznego przez wyizolowane komórki szczurzego Kupffera i komórki hepatocytów”

Regulacja ludzkich komórek osteoprogenitorowych pochodzących ze szpiku kostnego za pomocą osteogennych czynników wzrostu.

Ludzki szpik kostny zawiera odrębną populację komórek, która wyraża białka kostne i reaguje na transformujący czynnik wzrostu beta (TGF-beta), ale nie na hematopoetyczne czynniki wzrostu (Long, MW, JL Williams i KG Mann., 1990. J. Clin. Invest 86: 1387-1395). Obecnie opisujemy izolację, charakterystykę i odpowiedź czynnika wzrostu tych prekursorów na ludzkie osteoblasty i identyfikację ludzkiej komórki osteoprogenitorowej. Continue reading „Regulacja ludzkich komórek osteoprogenitorowych pochodzących ze szpiku kostnego za pomocą osteogennych czynników wzrostu.”