Degradacja fibryny i elastyny przez nienaruszone ludzkie makrofagi pęcherzykowe in vitro. Charakterystyka aktywatora plazminogenu i jego roli w degradacji macierzy.

Odkładanie fibryny odgrywa znaczącą rolę w histopatologii wielu zapalnych chorób płuc. Plazminę, aktywowaną lokalnie w płucach, może degradować nie tylko tę fibrynę, ale również białka strukturalne ważne dla prawidłowej architektury płuc. Ponieważ makrofagi pęcherzykowe odgrywają istotną rolę w procesach zapalnych płuc, zbadaliśmy aktywność aktywatora plazminogenu (PA) ludzkich makrofagów pęcherzyków płucnych. Nienaruszone makrofagi pęcherzykowe z każdego z 10 zdrowych osobników wyrażały aktywność PA. Nie było różnicy w aktywności pomiędzy palącymi i niepalącymi osobami. Continue reading „Degradacja fibryny i elastyny przez nienaruszone ludzkie makrofagi pęcherzykowe in vitro. Charakterystyka aktywatora plazminogenu i jego roli w degradacji macierzy.”

Modyfikacja struktury błony komórkowej dzięki bogatym w cholesterol dyspersjom lipidowym. Model pierwotnej wady komórki limfatycznej.

Membrany bogate w cholesterol są cechą charakterystyczną czerwonych krwinek ostrych . Komórki tłuszczowe gromadzą cholesterol z lipoprotein surowicy bogatych w cholesterol. Wcześniejsze badania sugerowały, że ten dodany cholesterol jest odpowiedzialny zarówno za zmienioną morfologię, jak i zniszczenie komórek ostrych. Aby zbadać ten proces przy braku innych czynników w surowicy, przygotowano dyspersje cholesterol-lecytyna z różnymi ilościami niezestryfikowanego cholesterolu (C) w stosunku do fosfolipidu (P) i badano ich wpływ na prawidłowe krwinki czerwone. Cholesterolowe dyspersje lipidów (stosunek molowy C / P większy o 1,0) przenosiły cholesterol zarówno do błon czerwonych krwinek, jak i lipoprotein w surowicy, a dyspersje ubogie w cholesterol (stosunek molowy C / P poniżej 1,0) zubożały krwinki czerwone cholesterolu. Continue reading „Modyfikacja struktury błony komórkowej dzięki bogatym w cholesterol dyspersjom lipidowym. Model pierwotnej wady komórki limfatycznej.”

Związek pomiędzy uwalnianiem glukozy za pośrednictwem insuliny a metabolizmem lipidów u człowieka.

Aby ocenić możliwy wpływ metabolizmu lipidów na usuwanie glukozy za pośrednictwem insuliny, badano 18 kobiet bez cukrzycy typu Pima Indian (wiek 18-35 lat), stosując infuzję palmitynianu 1-14C w celu pomiaru szybkości wolnego obrotu kwasu tłuszczowego, a następnie za pomocą zacisku euglikemicznego (zacisk ) do pomiaru inaktywowanej glukozy metodą in vivo (M). Kalorymetrię pośrednią przeprowadzono w stanie podstawowym i podczas zaciskania. Zostało to wykorzystane do oceny szybkości utleniania glukozy, szybkości utleniania lipidów i obliczenia nieoksydacyjnego usuwania glukozy (przechowywania). Szybkość oksydacji podstawnej i klatkowej lipidów korelowała z podstawowym stężeniem wolnych kwasów tłuszczowych w osoczu (r = 0,81, P mniejszym niż lub równym 0,0001, r = 0,67, P mniej niż 0,003, odpowiednio). Spadek utleniania lipidów był silnie skorelowany ze wzrostem utleniania glukozy podczas infuzji insuliny (r = 0,96, P mniejszy lub równy 0,0001). Continue reading „Związek pomiędzy uwalnianiem glukozy za pośrednictwem insuliny a metabolizmem lipidów u człowieka.”

Tłumienie naturalnego zabijania in vitro przez monocyty i leukocyty polimorfojądrowe: zapotrzebowanie na reaktywne metabolity tlenu.

Naturalne komórki zabijające spontanicznie ulegają lizie niektórych komórek nowotworowych i mogą bronić się przed nowotworami złośliwymi. Wcześniej wykazaliśmy, że naturalne zabijanie (NK) przez ludzkie jednojądrzaste komórki krwi obwodowej (PBMC) jest tłumione in vitro przez promotory guza z dielektroazoforami, w tym 12-O-tetradekanoiloforbol-13-octan (TPA). Pokazujemy tu, że supresję NK pośredniczą w monocytach lub leukocytach polimorfojądrowych (PMN) i że supresja zależy od generowania reaktywnych form tlenu cząsteczkowego (RO), w szczególności nadtlenku wodoru (H2O2). NK został stłumiony nie tylko przez TPA, ale także opsonizowany zymosan (ściany komórkowe drożdży), które, podobnie jak TPA, nie były toksyczne dla PBMC. Zarówno TPA, jak i zymosan stymulowały produkcję anionu ponadtlenkowego (O2-) i H2O2 przez PBMC. Continue reading „Tłumienie naturalnego zabijania in vitro przez monocyty i leukocyty polimorfojądrowe: zapotrzebowanie na reaktywne metabolity tlenu.”

Badania czynników V i VIII: C w zwierzęcym modelu rozsianego wykrzepiania wewnątrznaczyniowego.

Opisano eksperymentalny model zwierzęcy rozsianego wykrzepiania wewnątrznaczyniowego (DIC) indukowanego przez współinusję czynnego z koagulantem fosfolipidu i aktywowanego czynnika X (czynnik Xa). Wlew czynnika Xa w dawce 6,6 X 10 (-12) mol / kg z pęcherzykami lipidowymi fosfatydylocholiny / fosfatydyloseryny (PCPS) w dawce 4,0 x 10 (-8) mola / kg był związany ze znacznym spadkiem poziomów fibrynogenu i czynników V i VIII oraz rozwiniętą skazę krwotoczną. Testy czynników V i VIII przeprowadzono, odpowiednio, w jednostopniowym czasie protrombinowym i układzie częściowej trombiny aktywowanej. W dodatkowych doświadczeniach badano wpływ tej samej kombinacji dawek czynnika Xa / PCPS na kinetykę czynnika V przez wstępną infuzję znaczonego 125I czynnika V. Po infuzji czynnika Xa / PCPS, czynniki VIII i V zmniejszono po 2 min przez 90 i 50 % poziomów preinfuzji, odpowiednio, i po godzinie odpowiednio o 80 i 75%. Continue reading „Badania czynników V i VIII: C w zwierzęcym modelu rozsianego wykrzepiania wewnątrznaczyniowego.”

Reologia Leukocytów, Zawiesiny Leukocytów i Krwi w Białaczce MOŻLIWE ZWIĄZKI Z KLINICZNYMI MANIFESTAMI

Zawiesiny limfocytów białkowych i mieloblastów oraz krwi pacjentów białaczkowych zostały przebadane w celu zbadania (a) wpływu komórek białaczkowych na lepkość krwi i (b) zdolności komórek białaczkowych do przechodzenia przez kanały o średnicy kapilary. Lepkość zawiesin komórek białaczkowych była logarytmicznie zależna od (a) współczynnika szybkości ścinania i (b) cytokrytu, chociaż zawiesiny małych limfocytów i mieloblastów miały podobną lepkość przy równoważnych szybkościach ścinania i cytokrycie. Minimalna lepkość pozorna (MAV) komórek białaczkowych i czerwonych krwinek, mierzona przy szybkości ścinania 2,3-230 s-1, była logarytmicznie zależna od cytokrytu. Jednak MAV było nieco większe dla komórek białaczkowych niż dla krwinki czerwonej w cytokrytach do 20%. W cytokrytach powyżej 20%. Continue reading „Reologia Leukocytów, Zawiesiny Leukocytów i Krwi w Białaczce MOŻLIWE ZWIĄZKI Z KLINICZNYMI MANIFESTAMI”

Wewnątrzkomórkowa farmakokinetyka poliglutaminianów metotreksatu w ludzkich komórkach raka sutka. Selektywna retencja i mniej dysocjacyjne wiązanie 4-NH2-10-CH3-pteroiloglutamate4 i 4-NH2-10-CH3-pteroilglutamate5 do reduktazy dihydrofolianowej.

Metotreksat (MTX-Glu1) wywiera działanie przeciwnowotworowe poprzez silne hamowanie reduktazy dihydrofolianowej (DHFR), enzymu odpowiedzialnego za utrzymywanie puli komórkowej zredukowanych folanów. Ponieważ kompleks lek-enzym (związany lek) jest powoli degradowalny, wymagany jest nadmiar leku (niezwiązany lub wolny lek) powyżej wymaganego do związania wszystkich miejsc enzymu, aby konkurować z substratem o miejsca udostępnione przez dysocjację enzymu-leku. Zbadaliśmy rolę poliglutamylowych metabolitów MTX-Glu1 zawierających dwie do pięciu grup glutamylowych (MTX-Glu2-5) w wiązaniu peptydu gamma w utrzymywaniu wewnątrzkomórkowej puli wolnego leku i tworzeniu wolno dysocjowalnych kompleksów z DHFR. Podczas 24-godzinnych inkubacji ludzkich komórek raka sutka ZR-75-B z 2 mikroM MTX-Glu1 obserwowaliśmy progresywne tworzenie pochodnych z dwoma do pięciu grupami glutamylowymi, które szybko zastąpiły związek macierzysty w miejscach wiążących enzymy i stanowiły 85% zarówno niezwiązanego jak i związanego leku wewnątrzkomórkowego na końcu inkubacji. Gdy komórki umieszczono następnie w pożywce wolnej od narkotyków, szybkość znikania leku i metabolitów z frakcji wewnątrzkomórkowych związanych i wolnych zmniejszyła się wraz ze wzrostem długości łańcucha glutamylowego. Continue reading „Wewnątrzkomórkowa farmakokinetyka poliglutaminianów metotreksatu w ludzkich komórkach raka sutka. Selektywna retencja i mniej dysocjacyjne wiązanie 4-NH2-10-CH3-pteroiloglutamate4 i 4-NH2-10-CH3-pteroilglutamate5 do reduktazy dihydrofolianowej.”

Adhezja bakteryjna za pośrednictwem przeciwciał do indukowanych cytomegalowirusem receptorów Fc. Potencjalny związek z infekcjami wtórnymi komplikującymi infekcje herpeswirusa.

Ostatnio wykazano, że cytomegalowirus (CMV) i inne wirusy w grupie opryszczki indukują receptory Fc w zakażonych pojedynczych warstwach. Zbadaliśmy możliwość, że takie receptory mogą ułatwić przywieranie bakterii opłaszczonych przez przeciwciała komórkom zakażonym CMV. Aby to zrobić, zainfekowaliśmy zlewane monowarstwy komórek ludzkiego zarodka płuca (HEL) za pomocą CMV (szczep AD 169), a następnie zastosowano podwójny test radioznakowania w celu zmierzenia przylegania Escherichia coli 06 zarówno do monowarstwy zainfekowanej i kontrolnej. Przebadaliśmy zainfekowane monowarstwy 48 godzin po wysianiu wirusowym, w którym to czasie 30-60% komórek wykazywało charakterystyczne zmiany cytopatyczne. Porównaliśmy przyczepność nietraktowanych E. Continue reading „Adhezja bakteryjna za pośrednictwem przeciwciał do indukowanych cytomegalowirusem receptorów Fc. Potencjalny związek z infekcjami wtórnymi komplikującymi infekcje herpeswirusa.”

Ostre uwolnienie tyreotropiny u noworodka

Pomiary stężenia tyreotropiny w surowicy (TSH) przeprowadzono w krwi matczynej i płodowej podczas porodu i porodu oraz we wczesnym okresie poporodowym i noworodkowym. Średnie stężenie TSH było znacząco wyższe we krwi pępowinowej (9,5 j./ml) niż we krwi matek (3,9 .j./ml), co wskazuje na płodowo-matczyny gradient TSH w czasie ciąży. Stężenie TSH w surowicy u noworodków szybko wzrastało do średniego poziomu 60 U / ml po 10 min i 86 U / ml po 30 min. Pomiędzy 30 minutą a 3-4 godzinami poziom w surowicy szybko spadał, a następnie stopniowo spadał do średniego stężenia 13 U U / ml po 48 godzinach. Okres półtrwania w obniżeniu stężenia TSH w surowicy pomiędzy 30 a 90 min wynosił 77 min, wartość nieco większa niż połowa czasu zanikania radioaktywnego jodu znakowanego radioaktywnie TSH mierzonego u dorosłych. Continue reading „Ostre uwolnienie tyreotropiny u noworodka”

Gromadzenie wapnia w reperfuzyjnym mięśniu sercowym za pośrednictwem alfa-adrenergicznego.

Powtarzanie niedokrwiennego miokardium wiąże się ze wzrostem całkowitego stężenia wapnia w mięśniu sercowym (Ca + 2), co może wpływać na ostateczny stopień uszkodzenia niedokrwiennego, a także na rozwój arytmii. Ponieważ reperfuzja jest również związana ze zwiększoną odpowiedzią alfa-adrenergiczną, to badanie przeprowadzono w celu określenia potencjalnych interakcji między receptorami alfa-adrenergicznymi a wapniem mięśnia sercowego podczas reperfuzji. Koty poddano 35 minutom zamknięcia lewej tętnicy wieńcowej przedniej zstępującej i 10 minutom reperfuzji. Całkowity poziom wapnia w mięśniu sercowym mierzono metodą absorpcyjnej spektrometrii atomowej. Wapń wewnątrzkomórkowy obliczono na podstawie pomiarów przestrzeni pozakomórkowej [(3H] inuliny). Continue reading „Gromadzenie wapnia w reperfuzyjnym mięśniu sercowym za pośrednictwem alfa-adrenergicznego.”