Metabolizm glukozy mięśni po ćwiczeniach na szczurach: ZWIĘKSZONA WRAŻLIWOŚĆ NA INSULIN

Zapasy glikogenu mięśniowego wyczerpują się podczas ćwiczeń i są szybko uzupełniane w okresie zdrowienia. Aby zbadać mechanizm tego zjawiska, niewyszkolone samce szczurów przepuszczano przez 45 minut na bieżni napędzanej silnikiem, a zdolność ich mięśni do wykorzystywania glukozy była następnie oceniana podczas perfuzji ich izolowanych tylnych ćwiartek. Wykorzystanie glukozy przez ćwierćtusz tylny było takie samo u badanych i kontrolnych szczurów perfundowanych pod nieobecność dodanej insuliny; jednak po dodaniu insuliny (30-40 000 U / ml) do perfuzatu, wykorzystanie glukozy było większe po wysiłku. Wcześniejsze ćwiczenia obniżyły zarówno stężenie insuliny, które w połowie maksymalnie stymulowało wykorzystanie glukozy (ćwiczenia, 150 | j / ml, kontrola, 480 | j / ml) i nieznacznie zwiększyło jego maksymalny efekt. Wzrost wrażliwości na insulinę utrzymywał się przez 4 h po wysiłku, ale nie był obecny po 24 godzinach. Continue reading „Metabolizm glukozy mięśni po ćwiczeniach na szczurach: ZWIĘKSZONA WRAŻLIWOŚĆ NA INSULIN”

Metabolizm triglicerydów w osoczu w chorobach tarczycy

Osoczową endogenną kinetykę transportu triglicerydów określono w 16 przypadkach nadczynności tarczycy oraz u 12 pacjentów z niedoczynnością tarczycy, a wyniki porównywano z wynikami osób z kontrolą eutyreozy. Ponadto u tych pacjentów zbadano usunięcie egzogennego rozdrobnionego tłuszczu (Intralipid, Vitrum, Szwecja) z krążenia i aktywność lipolityczną osocza poheparynowego (PHLA) w celu dalszego scharakteryzowania zmian metabolizmu trójglicerydów w osoczu w chorobie tarczycy. W tyreotoksykozie średni poziom triglicerydów w osoczu nieznacznie, ale znacznie wzrósł powyżej poziomu kontrolnego. Ta zmiana była związana ze zwiększoną produkcją triglicerydów, podczas gdy średnia prędkość usuwania frakcji nie różniła się od normalnej. Istniała istotna korelacja liniowa między stężeniem i szybkością obrotu triglicerydów w osoczu zarówno u pacjentów z nadczynnością tarczycy, jak i eutyreozy, ale stosunek stężenia do szybkości obrotu był mniejszy w pierwszej grupie, co sugeruje, że skuteczność usuwania trójglicerydów z krążenia poprawiła się w nadczynności tarczycy . Continue reading „Metabolizm triglicerydów w osoczu w chorobach tarczycy”

Rola nadtlenku wodoru wytwarzanego przez komórki w zabijaniu Schistosomula Schistosoma mansoni za pośrednictwem granulocytów In Vitro

Wykazano, że ludzkie, jak również mysie granulocyty zabijają stadia larwalne pasożytów pasożytniczych; mechanizm tej cytotoksyczności za pośrednictwem komórek jest jednak słabo poznany. Niniejsze badanie zostało zaprojektowane w celu oceny roli procesów peroksydacyjnych w zabijaniu schistosoma mansoni przez ludzkie granulocyty in vitro. Szybkość wytwarzania H2O2 przez ludzkie neutrofile, eozynofile i leukocyty bazalne mierzono po inkubacji z samą schistosomulą lub w obecności swoistego przeciwciała lub dopełniacza. Opsonizowane pasożyty (przeciwciało i / lub dopełniacz) zwiększały szybkość wytwarzania H2O2 przez neutrofile, eozynofile i bazofile o odpowiednie wartości procentowe 500, 500 i 371. Szybkość uwalniania H2O2 była bezpośrednio związana z liczbą granulocytów i proporcją komórek przyczepionych do powierzchni schistosomuli. Continue reading „Rola nadtlenku wodoru wytwarzanego przez komórki w zabijaniu Schistosomula Schistosoma mansoni za pośrednictwem granulocytów In Vitro”

Wzorce stężenia fosforybozylopropionianu i stężenia rybozo-5-fosforanu w fibroblastach od pacjentów z nadprodukcją dny i puryn.

U większości pacjentów z dną moczanową i nadmiernym wytwarzaniem kwasu moczowego, nie stwierdzono istotnych nieprawidłowości enzymów. W niniejszym badaniu dokonano pomiaru szybkości wytwarzania i stężenia fosforanu fosfibibrylu (PP-rybozy-P) oraz stężenia rybozo-5-fosforanu w hodowanych komórkach w celu ustalenia klasyfikacji nadproduktów purynowych do bezpośredniego badania dodatkowego enzymu defekty. Fibroblasty hodowano od 24 osobników przypisanych do 4 grup: grupa 1, 5 osób zdrowych; grupa 2, 5 pacjentów z dną moczanową i normalnym wydalaniem moczu z moczem (kontrola dny moczanowej); grupa 3, 7 pacjentów z dobrze zdefiniowanymi nieprawidłowościami enzymów i nadmiernym wydzielaniem kwasu moczowego (4 z niedoborem fosforybozylotransferazy hipoksantyny-guaniny i 3 z nadmierną aktywnością syntetazy PP rybozy-P); i grupa 4, 7 pacjentów z dną i nadmiernym wydalaniem kwasu moczowego, ale bez rażąco nieprawidłowych aktywności powyższych enzymów w lizatach erytrocytów. We wszystkich 14 szczepach fibroblastów od pacjentów wykazujących nadmierne wytwarzanie kwasu moczowego (grupy 3 i 4), wskaźniki syntezy puryn de novo i stężenia PP-rybozy-P przekraczały wartości dla komórek z grup kontrolnych. Komórki z grupy 3 pacjentów z niedoborem fosforybozylotransferazy hipoksantynowo-guaninowej wykazywały normalne wytwarzanie PP-rybozy-P, podczas gdy te z nadmierną aktywnością syntetazy PP rybozy-P wykazały zwiększone wytwarzanie tego regulacyjnego substratu. Continue reading „Wzorce stężenia fosforybozylopropionianu i stężenia rybozo-5-fosforanu w fibroblastach od pacjentów z nadprodukcją dny i puryn.”

Cytotoksyczność in vitro i ochrona transplantacyjna przez autologiczne naturalne i aktywowane zabójcze komórki przeciwko transformowanej in vitro rakotwórczej linii fibroblastów. Studium przypadku.

Cytotoksyczną odpowiedź immunologiczną przez autologiczne komórki NK (NK) przeciwko spontanicznej transformowanej in vitro rakotwórczej linii fibroblastów, VIP-F: T, badano w 4-godzinnym oznaczeniu mikrocytotoksyczności z uwalnianiem 51Cr i w technice neutralizacji komórek nowotworowych in vivo u myszy nagich. . Chociaż wysoce cytotoksyczne wobec docelowego prototypu NK K562, autologiczne komórki NK w stanie początkowym były tylko nieznacznie cytotoksyczne wobec VIP-F: T i niereaktywne wobec autologicznych normalnych fibroblastów, Pen-F2. Autologiczna aktywność NK przeciwko VIP-F: T może jednak być indukowana przez 2-16-godzinne traktowanie komórek NK kilkoma gatunkami interferonu i interleukiną 2 wolną od interferonu (IL-2). Wspólna hodowla in vitro (IVC) w IL-2 autologicznych limfocytów krwi obwodowej (PBL) przeciwko VIP-F: T została przedstawiona za pomocą sortowania komórek aktywowanych fluorescencyjnie i przez konkurencję z zimnym celem w celu wygenerowania prawie wyłącznie populacji efektorowej zawierającej HNK-1 oraz fenotypy Leu-11a, które wykazywały specyficzność wobec receptora dla VIP-F: T różniła się od receptorów na komórkach Pen-F2 lub K562. Continue reading „Cytotoksyczność in vitro i ochrona transplantacyjna przez autologiczne naturalne i aktywowane zabójcze komórki przeciwko transformowanej in vitro rakotwórczej linii fibroblastów. Studium przypadku.”

Ugrupowanie węglowodanowe czynnika von Willebranda nie jest konieczne do utrzymania struktury multimerycznej i aktywności kofaktora rystocetyny, ale chroni przed degradacją proteolityczną.

Aby lepiej zdefiniować rolę węglowodanów w strukturze i aktywność kofaktora ristocetyny czynnika von Willebranda, usunęliśmy do 83% całkowitej heksozy poprzez sekwencyjne traktowanie cząsteczki endo-beta-N-acetylo-glukozoaminidazą F (endo F) , neuraminidaza i beta-galaktozydaza. Sam Endo F usuwał 69% całkowitej heksozy i D-galaktozy i 71% kwasu sialowego. Jednakże nie było zauważalnej utraty dużych multimerów, a aktywność kofaktora rystocetyny została zmniejszona tylko o 11%. Zredukowana podjednostka czynnika von Willebranda migruje szybciej w żelach poliakrylamidowych zawierających SDS, co odpowiada 10% spadkowi masy cząsteczkowej. Wszystkie multimery nieredukowanego, modyfikowanego węglowodanowo czynnika von Willebranda migrowały szybciej w SDS-agarozie, ale wzór trypletowy poszczególnych multimerów pozostał niezmieniony. Continue reading „Ugrupowanie węglowodanowe czynnika von Willebranda nie jest konieczne do utrzymania struktury multimerycznej i aktywności kofaktora rystocetyny, ale chroni przed degradacją proteolityczną.”

Naturalna komórka zabójcy w układowym toczniu rumieniowatym. Wady w litycznej aktywności efektorowej i odpowiedzi na interferon i induktory interferonu.

Spontaniczna cytotoksyczność, w której pośredniczą komórki NK, jest upośledzona w kilku chorobach ludzkich, w tym układowym toczniu rumieniowatym (SLE). Dokładny mechanizm (mechanizmy), dzięki któremu aktywność NK jest tłumiona u pacjentów z SLE, jest ogólnie nieznana. Niniejsze badanie zaprojektowano tak, aby skupić się na wadach komórkowych per se w komórkach NK od pacjentów ze SLE. Zaobserwowano, że zwykłe działanie wzmacniające interferon (IF) i induktory IF było istotnie upośledzone u pacjentów z SLE. Z 24 pacjentów z SLE badanych 17 miało istotnie obniżoną aktywność NK w stosunku do kontroli. Continue reading „Naturalna komórka zabójcy w układowym toczniu rumieniowatym. Wady w litycznej aktywności efektorowej i odpowiedzi na interferon i induktory interferonu.”

Ludzkie makrofagi pęcherzykowe syntetyzują czynnik VII in vitro. Możliwa rola w śródmiąższowej chorobie płuc.

Zarówno fibryna, jak i makrofagi tkankowe są widoczne w histopatologii przewlekłej zapalnej choroby płuc. W związku z tym zbadaliśmy aktywność prokoagulacyjną świeżo spłukanych ludzkich makrofagów pęcherzyków płucnych in vitro. Nienaruszone makrofagi (5 X 10 (5) komórek od 13 zdrowych ochotników sprzyjały krzepnięciu całego osocza w ciągu średnio 65 sekund. Aktywność prokoagulacyjna makrofagów była co najmniej częściowo niezależna od egzogennego czynnika VII, jak oceniono przez średni czas krzepnięcia 99 s w osoczu z niedoborem czynnika VII i przez neutralizację aktywności prokoagulanta przez przeciwciało względem czynnika VII. Immunoprecypitacja ekstraktów makrofagów metabolicznie znakowanych [35S] metioniną przez przeciwciało czynnika VII i analizowana za pomocą elektroforezy w żelu poliakryloamidowym z dodecylosiarczanem sodu ujawniła znakowane białko o wielkości zgodnej ze znaną masą cząsteczkową czynnika VII krwi, 48 000. Continue reading „Ludzkie makrofagi pęcherzykowe syntetyzują czynnik VII in vitro. Możliwa rola w śródmiąższowej chorobie płuc.”

Wiele małych cukrzycy wywołanych streptozotocyną małych dawek u myszy. Dowody na stymulację cytotoksycznej komórkowej odpowiedzi odpornościowej przeciwko linii komórek beta produkujących insulinę.

Myszy badano na obecność splenocytów specyficznie cytotoksycznych dla szczurzych linii komórek insulinoma (RIN) podczas indukcji cukrzycy przez streptozotocynę (SZ) w wielu niskich dawkach (Multi-Strep). Cytotoksyczność oceniano ilościowo przez uwalnianie 51Cr z uszkodzonych komórek. Niski, ale statystycznie istotny poziom cytolizy (5%) przez splenocyty był pierwszy wykrywalny w dniu 8 po pierwszej dawce SZ. Cytotoksyczność osiągnęła maksimum około 9% w dniu 10 i powoli zmniejszała się po tym czasie, stając się niewykrywalna 42 dni po pierwszym podaniu SZ. Przebieg czasowy odpowiedzi cytotoksycznej in vitro korelował ze stopniem zapalenia wyrostka robaczkowego widocznym w trzustce myszy Multi-Strep. Continue reading „Wiele małych cukrzycy wywołanych streptozotocyną małych dawek u myszy. Dowody na stymulację cytotoksycznej komórkowej odpowiedzi odpornościowej przeciwko linii komórek beta produkujących insulinę.”

Lipoproteiny i apolipoproteiny w surowicy u szczurów z cukrzycą indukowaną streptozotocyną.

Badano lipoproteiny szczurów karmionych wysoką dietą sacharozy i wytworzono cukrzycę przez podanie 45 mg / kg streptozotocyny. Stwierdzono, że wszystkie klasy lipoprotein obecne są w zwiększonych stężeniach. Skład apolipoprotein różnych frakcji lipoproteinowych badano za pomocą elektroforezy w żelu poliakryloamidowym w obecności 8 M mocznika, ogniskowania izoelektrycznego w obecności 8 M mocznika i elektroforezy w żelu poliakrylamidowym z dodecylosiarczanem sodu. W lipoproteinach o bardzo niskiej gęstości (VLDL) u szczurów z cukrzycą obserwowano wyraźną zmianę względnych ilości białek C przez elektroforezę w żelu poliakrylamidowym, a to stwierdzono przez ogniskowanie izoelektryczne za głównie względny wzrost C-III-3. apoproteina i spadek C-III-O. Continue reading „Lipoproteiny i apolipoproteiny w surowicy u szczurów z cukrzycą indukowaną streptozotocyną.”