Udział prostaglandyn w kontroli przepływu krwi przez nerki podczas ostrego zmniejszenia rzutu serca u psa

Aby ustalić, czy nerkowe prostaglandyny uczestniczą w regulacji przepływu krwi przez nerki podczas ostrego zmniejszenia pojemności minutowej serca, powrót 17 żył sercowych został zmniejszony u 17 znieczulonych psów poprzez pompowanie balonu umieszczonego w klatce piersiowej dolnej żyły głównej dolnej. Ten manewr zmniejszył pojemność minutową serca z 3,69. 0,09 litrów / min (średnia . SEM) do 2,15. 0,19 litrów / min (P <0,01) i średniego ciśnienia tętniczego od 132. Continue reading „Udział prostaglandyn w kontroli przepływu krwi przez nerki podczas ostrego zmniejszenia rzutu serca u psa”

Oddziaływanie komórek neutrofil-śródbłonka. Modulacja przylegania neutrofilów indukowana przez fragmenty dopełniacza C5a i C5a des arg i formyl-metionylo-leucylo-fenyloalaniny in vitro.

Przyleganie neutrofili do naczyniowych komórek śródbłonka jest początkowym wydarzeniem w emigracji neutrofili przez ściany naczyń krwionośnych do miejsc zapalnych tkanki; proces ten przypisywany jest powstawaniu pozanaczyniowych czynników chemotaktycznych. Aby zbadać wpływ czynników chemotaktycznych na przyleganie neutrofili do śródbłonka, opracowaliśmy czułe, powtarzalne oznaczenie przylegania do mikromiareczkowania in vitro. Niespulsowana adhezja ludzkich neutrofili do linii hodowlanej monowarstwy komórek śródbłonka żyły ludzkiej pępowiny w linii podstawowej wynosiła 35,2 +/- 0,9%, co odpowiada 3 do 4 neutrofili na komórkę śródbłonka. Dodanie oczyszczonego fragmentu dopełniacza C5a des arg lub formyl-metionylo-leucylo-fenyloalaniny (FMLP), w stężeniach w zakresie od 10 (-10) do 10 (-6) M, zwiększone przyleganie neutrofili do śródbłonka w sposób zależny od dawki . Oczyszczone C5a i C5a des arg były zasadniczo równe pod względem zdolności do zwiększania przylegania neutrofili, w przeciwieństwie do poprzednio opisanej większej siły działania C5a in vitro w porównaniu z C5a des arg w stymulowaniu chemotaksji neutrofili i uwalnianiu enzymu. Continue reading „Oddziaływanie komórek neutrofil-śródbłonka. Modulacja przylegania neutrofilów indukowana przez fragmenty dopełniacza C5a i C5a des arg i formyl-metionylo-leucylo-fenyloalaniny in vitro.”

Prostaglandyny pośredniczą w działaniu rozszerzającym naczynia mannitolu w hipoperfuzji nerki szczura.

Wcześniej donieśliśmy, że mannitol uderzająco zwiększa przepływ krwi do nerkowych nerek hipoperfuzji przy 35-40 mm Hg. To działanie rozszerzające naczynia krwionośne nie jest spowodowane rozszerzeniem objętości ani zmianami osmolalności osocza. Przetestowaliśmy hipotezę, że działanie wazodylatacyjne mannitolu w niedokrwiennej nerce szczura jest zależne od jednego z wazoaktywnych układów hormonów nerkowych: renina-angiotensja, kallikreina-kinina lub prostaglandyn. Szczurom podawano 5% mannitolu w 0,9% soli fizjologicznej do 3-5% masy ciała. Zgodnie z naszymi wcześniejszymi badaniami, RBF wzrósł 1,3 +/- 0,1 ml / min pomimo utrzymywania ciśnienia perfuzji przy 35-40 mm Hg. Continue reading „Prostaglandyny pośredniczą w działaniu rozszerzającym naczynia mannitolu w hipoperfuzji nerki szczura.”

Powinowactwo cystationiny a-Syntaza do 5-fosforanu pirydoksalu w hodowlanych komórkach: MECHANIZM DLA HOMOCYSTYNURY ODPOWIEDNIEJ DO PYRIDOKSYNY

Poprzednie próby korelacji odpowiedzi in vivo na pirydoksynę z testami in vitro aktywności a -syntazy cystationinowej u pacjentów z niedoborem syntazy z udziałem homocystinurii tylko częściowo zakończyły się sukcesem. Wszystkie takie badania przeprowadzono jednak z ekstraktami hodowanych fibroblastów skóry hodowanych w pożywce zawierającej wysokie stężenie (1000 ng / ml) pirydoksalu. Ostatnio wykazano, że takie warunki wzrostu mogą ukrywać ważne aspekty interakcji enzym-koenzym poprzez nasycanie większości cząsteczek syntazy za pomocą ich kofaktora, 5-fosforanu pirydoksalu, ustaliliśmy warunki wzrostu komórek w pożywce wolnej od pirydoksalu. W tych warunkach wewnątrzkomórkowy 5 -fosforan pirydoksalu spadł o> 95%, a nasycenie apsyenzymu .-syntezy cystationiny 5-fosforanem pirydoksalu zmniejszyło się z wartości predefiniowanej o 70% do <10%. Gdy takie zubożone komórki hodowano w pożywkach zawierających stężenia pirydoksalu w zakresie od 0 do 1000 ng / ml, komórkowy fosforan 5-pirydoksalu osiągnął maksymalnie 30 ng / mg białka komórkowego przy średnim stężeniu pirydoksalu wynoszącym 100 ng / ml. Continue reading „Powinowactwo cystationiny a-Syntaza do 5-fosforanu pirydoksalu w hodowlanych komórkach: MECHANIZM DLA HOMOCYSTYNURY ODPOWIEDNIEJ DO PYRIDOKSYNY”

Ostra przerywana porfiria: charakterystyka nowej mutacji w genie strukturalnym deaminazy porfobilinogenu. Demonstracja niecatalitycznych produktów pośrednich enzymów stabilizowanych przez związany substrat.

Aby zbadać patologię molekularną w ostrej przerywanej porfirii (AIP), określono naturę defektywnej deaminazy porfobilinogenu (PBG) w lizatach erytrocytów od 165 heterogotów AIP z 92 niepowiązanych rodzin reprezentujących 20 różnych grup etnicznych lub demograficznych. Badania immunologiczne i fizykochemiczne ujawniły występowanie czterech klas mutacji dezaminaz PBG. W większości badanych rodzin ilość białka immunoreaktywnego odpowiadała ilości aktywności enzymatycznej, co wskazuje na brak reagującego krzyżowo materiału immunologicznego (CRIM) wytwarzanego przez zmutowany allel. W 78 z tych rodzin ujemnych pod względem CRIM (oznaczonych jako typ 1), dotknięte heterozygoty wykazywały połowę prawidłowej aktywności deaminaz PBG. W trzech rodzinach (oznaczonych jako negatywne 2 typu CRIM) u pacjentów z objawami stwierdzono zwiększone wydalanie z moczem kwasu delta-aminolewulinowego i PBG oraz prawidłowe stężenie erytrocytów w aktywności deaminaz PBG. Continue reading „Ostra przerywana porfiria: charakterystyka nowej mutacji w genie strukturalnym deaminazy porfobilinogenu. Demonstracja niecatalitycznych produktów pośrednich enzymów stabilizowanych przez związany substrat.”

Wpływ osmolalności i dostępności tlenu na rozpuszczalną zależną od AMP kinazę białkową szczurzej wewnętrznego rdzenia nerki szczura.

Wewnętrzny rdzeń nerkowy jest zwykle eksponowany na osmolalności znacznie wyższe i na napięcia O2 niższe niż w innych tkankach. Wpływ osmolalności i dostępności O2 na podstawową i argininową zależną od wasopresyny argininę (AVP) zależną od rozpuszczalnej cyklicznej (c) zależną od AMP kinazę białkową badano w kawałkach wewnętrznego rdzenia szczura. Zwiększenie całkowitej osmolalności mediów od 305 do 750 lub 1650 mM przez dodanie NaCl mocznika do standardowego buforu wodorowęglanu Krebs-Ringer znacznie zmniejszyło podstawową zawartość cAMP i wskaźniki aktywności kinazy białkowej. Stało się to w obecności lub nieobecności O2. Inkubacja plastrów w buforze o wysokiej osmolalności powodowała również stępienie wzrostu w cAMP rdzenia wewnętrznego i stosunkach aktywności kinazy białkowej indukowanych przez O2. Continue reading „Wpływ osmolalności i dostępności tlenu na rozpuszczalną zależną od AMP kinazę białkową szczurzej wewnętrznego rdzenia nerki szczura.”

Analiza in vivo białka trzustki i biosyntezy insuliny w modelu szczurzym dla cukrzycy insulinoniezależnej.

Celem tych eksperymentów było oszacowanie biosyntezy insuliny in vivo w modelu szczurzym dla cukrzycy insulinoniezależnej. Częstotliwość biosyntezy insuliny określono u zwierząt w wieku 4 tygodni, którym wstrzyknięto 90 mg / kg streptozotocyny 2 dni po porodzie. Zwierzęta kontrolne i z cukrzycą nie różniły się masą ciała ani glikemią na czczo. Poziom glukozy w osoczu był znacząco podwyższony (186 +/- 13 mikrogramów / dl w porównaniu z 139 +/- 7 mg / dl, P mniej niż 0,05), a zawartość insuliny trzustkowej została zmniejszona (41 +/- 2 mikrogramy / g w porównaniu z 63 + / – 8 mikrogramów / g, P mniej niż 0,05) u szczurów z cukrzycą. Biosyntezę insuliny oszacowano in vivo przez pomiar i porównanie włączenia [3H] leucyny do proinsuliny z włączeniem do całkowitego białka trzustki 45 minut po wstrzyknięciu. Continue reading „Analiza in vivo białka trzustki i biosyntezy insuliny w modelu szczurzym dla cukrzycy insulinoniezależnej.”

Zwłóknienie płuc wywołane przez bleomycynę u chomików. Pęcherzykowy produkt makrofagowy zwiększa fibroblastyczną prostaglandynę E2 i cykliczny monofosforan adenozyny i hamuje proliferację fibroblastów i produkcję kolagenu.

Zwłóknienie płuc wywołane przez bleomycynę u chomików jest związane z akumulacją kolagenu, która wynika ze zwiększonej szybkości syntezy kolagenu płucnego. Jednakże 1-2 tygodnie po wkropleniu dotchawiczym bleomycyny, tempo syntezy kolagenu w płucach spada w kierunku wartości kontrolnych. Aby ocenić potencjalną rolę makrofagów oskrzelowo-pęcherzykowych w regulowaniu produkcji kolagenu płucnego, badaliśmy wpływ makrofagów z chomików leczonych normalnie i bleomycyną na fibroblasty in vitro. Zaobserwowaliśmy: (a) Pożywka z hodowli makrofagów zmniejszyła inkorporację fibroblastów [3H] tymidyny i nie ulegające degradacji wytwarzanie [3H] hydroksyproliny w sposób zależny od dawki. Liczba komórek fibroblastów była obniżona w eksponowanych hodowlach, a żywotność fibroblastów pozostała niezmieniona. Continue reading „Zwłóknienie płuc wywołane przez bleomycynę u chomików. Pęcherzykowy produkt makrofagowy zwiększa fibroblastyczną prostaglandynę E2 i cykliczny monofosforan adenozyny i hamuje proliferację fibroblastów i produkcję kolagenu.”

Choroba Tangier: WYSOKA DEFICJENCJA LIPOPROTEIN WYSOKIEJ GĘSTOŚCI POWSTAŁA WADLIWEGO METABOLIZMU NIESTABILNEJ APOLIPOPROTEIN AI (APOA-ITANGIER)

Choroba Tangiera jest rzadką chorobą rodzinną charakteryzującą się powiększonymi pomarańczowymi migdałkami, przemijającą neuropatią obwodową, powiększeniem wątroby i śledziony oraz powiększeniem węzłów chłonnych, jak również uderzającą redukcją lipoprotein o wysokiej gęstości (HDL) i ich głównych składników białkowych, apolipoprotein (apo) AI i A-II . W celu przetestowania hipotezy, że pacjenci Tangeru mają nieprawidłowe apoA-I lub apoA-II, badano zależność między lipoproteinami in vitro a charakterystyką metaboliczną in vivo tych białek wyizolowanych z osocza normalnego i Tangiera u zdrowych osób i pacjentów z chorobą Tangeru. Po inkubacji z prawidłowym osoczem, znacznie większy procent znakowanego izotopowo ApoA-Tanger był związany z supernatantem 1,063-g / ml (6%) i 1,21 g / ml infranatu (19%) i niższym odsetkiem z HDL (75% ), niż te obserwowane dla prawidłowego apoA-I (odpowiednio 2, 8 i 90%). Przeciwnie, właściwości wiązania lipoprotein normalnych i Tangier apoA-II były bardzo podobne. Po wstrzyknięciu znakowanych izotopowo normalnych i Tangier apoA-I do normalnych podmiotów (n = 4), średni czas przebywania specyficznej aktywności dla apoA-ITangier był znacząco niższy, zarówno w osoczu (1,29 d), jak i w HDL (1,34 d). Continue reading „Choroba Tangier: WYSOKA DEFICJENCJA LIPOPROTEIN WYSOKIEJ GĘSTOŚCI POWSTAŁA WADLIWEGO METABOLIZMU NIESTABILNEJ APOLIPOPROTEIN AI (APOA-ITANGIER)”

Rola objętości w regulacji wydzielania wazopresyny podczas ciąży u szczurów.

Wcześniej obserwowaliśmy, że osmoregulacja i próg osmotyczny dla wydzielania hormonu antydiuretycznego zostały zmienione podczas ciąży u szczurów Sprague-Dawley, a niniejsze badanie oceniało wpływ objętości na uwalnianie wazopresyny argininy (AVP) podczas ciąży u tego gatunku. Podstawowa osmolalność osocza (Posm) i objętość wewnątrznaczyniowa wynosiły 297 +/- 3 mosmol / kg i 16,2 +/- 1,2 ml u dziewiczych zwierząt w porównaniu z 290 +/- 2 mosmol / kg i 20.2 +/- 2.3 ml u 14-c szczury i 287 +/- 3 mosmol / kg i 25,2 +/- 2,3 ml u szczurów w wieku 21 dni (w perspektywie krótkoterminowej) (P mniej niż 0,001, każda grupa ciężarna w porównaniu z dziewicą). Zmniejszenie objętości izosmotycznej wytworzono przez dootrzewnowy glikol polietylenowy. Objętość zmniejszyła się z do 26%, a ciśnienie krwi utrzymywało się na stałym poziomie aż do 16%. Osocze AVP (PAVP) nie wzrosło znacząco ani w grupie zwierząt w ciąży, ani w kontroli z pierwszego tłoczenia, aż do wyczerpania objętości krwi osiągnęło 6-7%, po czym poziomy wzrosły w podobny sposób wykładniczo u dziewiczych, 14-dniowych i 21-cio ciężarnych zwierząt . Continue reading „Rola objętości w regulacji wydzielania wazopresyny podczas ciąży u szczurów.”