Możliwa rola dinukleotydu nikotynamidoadeninowego jako wewnątrzkomórkowego regulatora transportu nerkowego fosforanu u szczurów.

W tych eksperymentach badaliśmy, czy NAD może służyć jako wewnątrzkomórkowy modulator transportu błony z graniami szczoteczkowymi (BBM) nieorganicznego fosforanu (Pi). NAD, zarówno utleniona (NAD +), jak i zredukowana (NADH), hamowała zależny od Na + wychwyt 32Pi w zakresie stężeń 10-300 mikroM NAD po dodaniu in vitro do pęcherzyków BBM izolowanych z kory nerki szczura, ale nie hamował BBM pobór D- [3H] glukozy lub wychwytu BBM 22Na +. Ani nikotynamid (NiAm), ani sama adenozyna nie wpływały na wychwyt BBP 32Pi. NAD miał podobny względny efekt (procentowe hamowanie) w BBM od szczurów stabilizowanych na diecie niskoproteinowej (0,07% Pi), diecie z wysokim Pi (1,2% Pi) lub normalnej diecie P (0,7% Pi). Następnie zbadaliśmy wpływ nerek na zmianę poziomu NAD tkanek in vivo. Continue reading „Możliwa rola dinukleotydu nikotynamidoadeninowego jako wewnątrzkomórkowego regulatora transportu nerkowego fosforanu u szczurów.”

Wpływ nitrogliceryny i propranololu na dystrybucję przepływającego miokardialnego przepływu krwi podczas niedokrwienia w przypadku braku zmian hemodynamicznych u psa bez znieczulenia

Chronicznie oprzyrządowane psy były używane do badania wpływu nitrogliceryny i propranololu na transmuralną dystrybucję przepływu krwi przez mięśnie sercowe podczas przejściowego niedokrwienia. Badania przeprowadzono po 7-14 dniach od wszczepienia sondy przepływomierza elektromagnetycznego i okludera balonowego na lewej tętnicy wieńcowej okrężnicy, umieszczenia kryształów sonaru w osłonie mniejszej osi oraz wszczepienia cewników lewego przedsionka, lewej komory i aorty. Okluder został napompowany, aby całkowicie przerwać przepływ przez 10 s, a następnie częściowe uwolnienie, aby przywrócić przepływ na poziomie 60% poziomu preokluzji. Podczas tego częściowego uwalniania, które służyło jako kontrola dla badania, regionalny przepływ krwi w mięśniu sercowym mierzono 7- do 10-. M radioaktywnymi mikrosferami. Continue reading „Wpływ nitrogliceryny i propranololu na dystrybucję przepływającego miokardialnego przepływu krwi podczas niedokrwienia w przypadku braku zmian hemodynamicznych u psa bez znieczulenia”

Prostaglandyny pośredniczą w działaniu rozszerzającym naczynia mannitolu w hipoperfuzji nerki szczura.

Wcześniej donieśliśmy, że mannitol uderzająco zwiększa przepływ krwi do nerkowych nerek hipoperfuzji przy 35-40 mm Hg. To działanie rozszerzające naczynia krwionośne nie jest spowodowane rozszerzeniem objętości ani zmianami osmolalności osocza. Przetestowaliśmy hipotezę, że działanie wazodylatacyjne mannitolu w niedokrwiennej nerce szczura jest zależne od jednego z wazoaktywnych układów hormonów nerkowych: renina-angiotensja, kallikreina-kinina lub prostaglandyn. Szczurom podawano 5% mannitolu w 0,9% soli fizjologicznej do 3-5% masy ciała. Zgodnie z naszymi wcześniejszymi badaniami, RBF wzrósł 1,3 +/- 0,1 ml / min pomimo utrzymywania ciśnienia perfuzji przy 35-40 mm Hg. Continue reading „Prostaglandyny pośredniczą w działaniu rozszerzającym naczynia mannitolu w hipoperfuzji nerki szczura.”

Krytyczne znaczenie zdolności do koncentracji w moczu w generowaniu napięcia w moczu

W celu oceny dystalnego wydzielania H + zaleca się pomiar gradientu stężenia dwutlenku węgla w moczu (PCO2) podczas alkalizacji moczu. Faktem, który nie był rozważany we wcześniejszych badaniach dotyczących PCO2 w moczu, jest to, że rozpuszczanie HCO3 w wodzie prowadzi do podniesienia poziomu PCO2, który jest wprost proporcjonalny do stężenia HCO3. Aby zbadać wzajemne relacje HCO3 w moczu i zakwaszenie moczu, zmierzyliśmy UB PCO2 w (a) obecności zwiększonego wydzielania H + i zmniejszonej zdolności koncentracji tj. Przewlekłej niewydolności nerek (CRF), (b) zwierząt z normalnym wydzielaniem H + i zmniejszonej zdolności koncentracji Szczury Brattleboro (BB) i (c) obecność zaburzonego wydzielania H + i zdolności koncentracji (traktowanie LiCl i po uwolnieniu jednostronnej niedrożności moczowodowej). Przy umiarkowanie podwyższonym poziomie HCO3 w osoczu (30-40 meq / litr), u normalnych szczurów uzyskano wysoce zasadowy mocz (pH moczu> 7,8) i zwiększono stężenie HCO3 w moczu i UB PCO2. Continue reading „Krytyczne znaczenie zdolności do koncentracji w moczu w generowaniu napięcia w moczu”

Powinowactwo cystationiny a-Syntaza do 5-fosforanu pirydoksalu w hodowlanych komórkach: MECHANIZM DLA HOMOCYSTYNURY ODPOWIEDNIEJ DO PYRIDOKSYNY

Poprzednie próby korelacji odpowiedzi in vivo na pirydoksynę z testami in vitro aktywności a -syntazy cystationinowej u pacjentów z niedoborem syntazy z udziałem homocystinurii tylko częściowo zakończyły się sukcesem. Wszystkie takie badania przeprowadzono jednak z ekstraktami hodowanych fibroblastów skóry hodowanych w pożywce zawierającej wysokie stężenie (1000 ng / ml) pirydoksalu. Ostatnio wykazano, że takie warunki wzrostu mogą ukrywać ważne aspekty interakcji enzym-koenzym poprzez nasycanie większości cząsteczek syntazy za pomocą ich kofaktora, 5-fosforanu pirydoksalu, ustaliliśmy warunki wzrostu komórek w pożywce wolnej od pirydoksalu. W tych warunkach wewnątrzkomórkowy 5 -fosforan pirydoksalu spadł o> 95%, a nasycenie apsyenzymu .-syntezy cystationiny 5-fosforanem pirydoksalu zmniejszyło się z wartości predefiniowanej o 70% do <10%. Gdy takie zubożone komórki hodowano w pożywkach zawierających stężenia pirydoksalu w zakresie od 0 do 1000 ng / ml, komórkowy fosforan 5-pirydoksalu osiągnął maksymalnie 30 ng / mg białka komórkowego przy średnim stężeniu pirydoksalu wynoszącym 100 ng / ml. Continue reading „Powinowactwo cystationiny a-Syntaza do 5-fosforanu pirydoksalu w hodowlanych komórkach: MECHANIZM DLA HOMOCYSTYNURY ODPOWIEDNIEJ DO PYRIDOKSYNY”

Wpływ nadtlenku wodoru na produkcję prostaglandyn i integralność komórkową w hodowanych komórkach śródbłonka świńskich aorty.

Uszkodzenie oksydacyjne śródbłonka naczyniowego może odgrywać ważną rolę w patogenezie miażdżycy tętnic i starzeniu oraz może częściowo tłumaczyć zmniejszoną syntezę prostacykliny naczyniowej (PGI2) związaną z obydwoma chorobami. Wykorzystując H2O2 do wywołania urazu, badaliśmy wpływ uszkodzeń oksydacyjnych na syntezę PGI2 w hodowanych komórkach śródbłonka (EC). Preinkubacja EC z H2O2 powodowała zależne od dawki hamowanie (stężenie hamujące [IC50] = 35 mikroM) tworzenia PGI2 z arachidonianu. Maksymalny efekt związany z dawką wystąpił w ciągu minuty po ekspozycji, chociaż znaczący H2O2 pozostał po 30 minutach (30% oryginału). Ponadto H2O2 powodowało zarówno zależne od czasu i dawki uszkodzenie prowadzące do rozerwania komórek, uwalniania dehydrogenazy mleczanowej i uwalniania 51Cr z wcześniej znakowanych komórek. Continue reading „Wpływ nadtlenku wodoru na produkcję prostaglandyn i integralność komórkową w hodowanych komórkach śródbłonka świńskich aorty.”

Biosynteza ludzkiego receptora C3b / C4b podczas różnicowania linii komórkowej HL-60. Identyfikacja i charakterystyka cząsteczki prekursora.

Receptor C3b (C3bR) linii komórkowej ludzkiej białaczki promielocytowej (HL-60) indukowano inkubując te komórki z dimetylosulfotlenkiem (DMSO) lub kwasem retinowym. Większość zróżnicowanych (potraktowanych DMSO lub kwasem retinowym) lecz niezróżnicowanych komórek tworzyło rozety z erytrocytami pokrytymi C3b i były to morfologicznie dojrzałe granulocyty. Komórki HL-60 znakowano powierzchniowo lub biosyntetycznie, a następnie solubilizowano w 1% Nonidet P-40 w obecności wielu inhibitorów proteazy. C3bR wyizolowano przez immunoprecypitację z przeciwciałami anty-C3bR lub przez chromatografię powinowactwa z elementami nieaktywnymi hemolitycznie, w których wewnętrzne wiązanie tioestrowe w łańcuchu alfa zostało rozszczepione (iC3) – lub sefarozy iC4. Autoradiografy żelów NaDodSO4-poliakryloamidu wskazywały, że znakowany powierzchniowo C3bR na zróżnicowanych komórkach miał liczbę 210 000 (nieredukowaną) lub 240 000 (warunki redukujące). Continue reading „Biosynteza ludzkiego receptora C3b / C4b podczas różnicowania linii komórkowej HL-60. Identyfikacja i charakterystyka cząsteczki prekursora.”

Rola wątroby w metabolizmie glukagonu

Całkowity immunoreaktywny glukagon trzustkowy (IRG) osocza oznaczano w próbkach pobranych jednocześnie z żyły wrotnej proksymalnej i żyły głównej górnej 26 zdrowych szczurów. Stosunek obwodowo-peryferyjny IRG wynosił 2,80 . 0,25, różnica między wręgami obwodowymi (a) 124 . 15 pg / ml, a procentowa ekstrakcja 58 . 3. Continue reading „Rola wątroby w metabolizmie glukagonu”

Dowody na rolę peptydów opioidowych w uwalnianiu wazopresyny argininy u świadomego szczura

Ostatnie doniesienia sugerują, że peptydy opioidowe mogą brać udział w wydalaniu nerkowym. Przeprowadzono zatem eksperymenty in vivo w celu określenia wpływu peptydów opioidowych na osmotyczne i nieosmotyczne uwalnianie wazopresyny argininowej (AVP) u przytomnego szczura. Zwierzętom doświadczalnym podawano dożylnie nalokson (20 .g / kg na minutę) lub oksaloran (40 .g / kg na minutę), chemicznie odmienni antagoniści opioidowi. Szczurom kontrolnym podawano wlew normalnego roztworu soli, nośnika dla antagonistów opioidów. We wszystkich trzech grupach osmotyczne uwalnianie AVP badano podczas ostrego hipertonicznego roztworu soli fizjologicznej (3%) (2 ml / 100 g masy ciała). Continue reading „Dowody na rolę peptydów opioidowych w uwalnianiu wazopresyny argininy u świadomego szczura”

Lipoproteiny i apolipoproteiny w surowicy u szczurów z cukrzycą indukowaną streptozotocyną.

Badano lipoproteiny szczurów karmionych wysoką dietą sacharozy i wytworzono cukrzycę przez podanie 45 mg / kg streptozotocyny. Stwierdzono, że wszystkie klasy lipoprotein obecne są w zwiększonych stężeniach. Skład apolipoprotein różnych frakcji lipoproteinowych badano za pomocą elektroforezy w żelu poliakryloamidowym w obecności 8 M mocznika, ogniskowania izoelektrycznego w obecności 8 M mocznika i elektroforezy w żelu poliakrylamidowym z dodecylosiarczanem sodu. W lipoproteinach o bardzo niskiej gęstości (VLDL) u szczurów z cukrzycą obserwowano wyraźną zmianę względnych ilości białek C przez elektroforezę w żelu poliakrylamidowym, a to stwierdzono przez ogniskowanie izoelektryczne za głównie względny wzrost C-III-3. apoproteina i spadek C-III-O. Continue reading „Lipoproteiny i apolipoproteiny w surowicy u szczurów z cukrzycą indukowaną streptozotocyną.”