Niektóre efekty wapnia na aktywację ludzkiego czynnika VIII / Von Willebrand Factor Protein przez trombinę

Gdy białko czynnik VIII / czynnik von Willebranda (FVIII / vWF) poddaje się ponownemu chromato- grafowaniu na 4% agarozie w 0,25 M CaCl2, aktywność białka i vWF pojawia się w objętości pustej przestrzeni, ale większa część aktywności prokoagulacyjnej FVIII wypada później. Ostatnie dowody sugerują, że opóźniona aktywność prokoagulacyjna czynnika VIII to proteolitycznie zmodyfikowana postać białka FVIII / vWF, która filtruje anomalnie z agarozy w 0,25 M CaCl2. Aby sprawdzić, czy trombina jest zaangażowana w proteazę, zbadano wpływ 0,25 M CaCl2 na FVIII / vWF i jego reakcję z trombiną. Około 30% aktywności prokoagulacyjnej FVIII zostało natychmiast utracone, gdy roztwory białka FVIII / vWF wytworzono w CaCl2 0,25 M. Gdy FVIII w 0,15 M NaCl aktywowano za pomocą 0,04 U trombiny / ml, a następnie uzyskano 0,25 M w CaCl2, aktywność prokoagulacyjna o szerokim zakresie stężenia białka FVIII / vWF pozostawała aktywowana przez co najmniej 6 godzin. Ale w 0,25 M CaCl2 wzrost aktywności prokoagulacyjnej FVIII w odpowiedzi na trombinę był znacznie bardziej stopniowy i po aktywacji aktywność prokoagulanta była stabilizowana przez 0,25 M CaCl2. Gdy aktywowane trombiną białko FVIII / vWF przesączono na 4% agarozie w 0,15 M NaCl, wystąpiła znaczna inaktywacja aktywności prokoagulacyjnej FVIII; jednak aktywność prokoagulacyjna, która pozostała eluowana w pustej objętości. W przeciwieństwie do tego, gdy aktywowane trombiną białko FVIII / vWF filtrowano w 0,25 M CaCl2, aktywność prokoagulacyjna FVIII eluowała również po objętości pustej przestrzeni i pozostawała aktywowana przez 6 godzin. Prospoagulant pik wyizolowany przez filtrowanie aktywowanego niehrombiny białka FVIII / vWF na agarozie w 0,25 M CaCl2 porównano z izolowanym z aktywowanego trombiną białka FVIII / vWF. Obydwa białka szczytowe aktywności prokoagulacyjnej miały mniej więcej tę samą swoistą aktywność vWF, co odpowiednie białko o pustej objętości. Przed redukcją wzory żelu z dodecylosiarczanem sodu dla dwóch białek szczytowych aktywności prokoagulacyjnej były takie same. Po redukcji, wzór żelu dla aktywowanej niedobrombina proteiny szczytowej aktywności prokoagulacyjnej zawierał prążki 195 000, 148 000-1 20000, 79 000, 61 000, 51 000 i 18 000 daltonów, podczas gdy wzorzec dla zredukowanego aktywowanego trombiną białka szczytowego aktywności prokoagulacyjnej zawsze wykazywał brak wyższego białka. pasma masy cząsteczkowej, ale konsekwentnie wykazywały, że cztery prążki o niższej masie cząsteczkowej są dobrze rozdzielone. Podsumowując, te wyniki sugerują, że trombina generuje aktywność prokoagulacyjną FVIII, która jest stabilizowana przez 0,25 M CaCl2 i eluuje nieprawidłowo z 4% agarozy w tym rozpuszczalniku.
[przypisy: trening ogólnorozwojowy na siłowni, ssanie oleju słonecznikowego, soczewki kontaktowe jednodniowe ]
[hasła pokrewne: bajki terapeutyczne dla dzieci, znieczulenie ogólne powikłania, wkładki ortopedyczne warszawa ]