Ludzki hormon przytarczyczny IMMUNOLOGICZNA CHARAKTERYSTYKA PRZECIWCIAŁA PRZED WYGLĄDEM GLANDULARNYM I SYNTETYCZNYMI FRAGMENTAMI AMINO-TERMINALNYMI 1-12 I 1-34 I ICH WYKORZYSTANIE W OZNACZANIU HORMONU IMMUNOREAKTYWNEGO W SERA CZŁOWIEKA

Przeciwciała przeciwko ekstraktowi kwasu mocznikowego-trichlorooctowego [hPTH- (TCA)] ludzkich guzów przytarczyc oraz syntetycznym NH2-końcowym fragmentom ludzkiego hormonu przytarczycznego hPTH- (1-12) i – (1-34) zostały opracowane u kóz do scharakteryzować immunochemicznie różne preparaty PTH i oszacować immunoreaktywny PTH (iPTH) w ludzkich surowicach. Oceniano je ilościowo na podstawie ich zdolności do wiązania [131I] -hPTH- (1-12), [131I] hPTH- (1-34) lub [131I] bydlęcego PTH (bPTH- (1-84)). Jakość przeciwciał oceniano przez odniesienie do hamowania ich oddziaływania z znakowanymi peptydami za pomocą syntetycznego hPTH zawierającego 34 reszt aminokwasowych na końcu NH2 lub ich fragmenty [hPTH- (1-12), – (13-34), – (18 -34), – (25-34), – (18-24)] lub przez peptyd pełnej długości oczyszczony metodą Sephadex G-100 hPTH- (1-84) [hPTH- (1-84) G-100] . Syntetyczne peptydy stosowane w tej pracy odpowiadają ich strukturze do sekwencji aminokwasowej 1-34 NH2, jak wyjaśniono przez Brewera i współpracowników (1972. Proc. Natl Acad. Sci., USA69: 3583-3588). Przeprowadzono również badania hamowania za pomocą bPTH- (1-34) i bPTH- (1-84). Anty-hPTH- (TCA) wykazywał swoistość ukierunkowaną na determinanty w COOH-końcu i końcu NH2 hPTH- (1-84) i wykazywał reaktywność krzyżową z bPTH- (1-84). Z drugiej strony anty-hPTH- (1-34) wykazywał swoistość immunologiczną skierowaną głównie na determinanty antygenowe zlokalizowane w końcowej połowie C hH hPTH- (1-34). Ponadto zaobserwowano pewną reaktywność z końcowym NH2 hPTH- (1-12) i pełnej długości peptydami ekstraktywnymi pochodzenia ludzkiego i bydlęcego. Przeciwciała skierowane przeciwko hPTH- (1-12) przereagowały krzyżowo z hPTH- (1-34) i – (1-84) G-100. iPTH został radioimmunologicznie oznaczony w ludzkich surowicach przez następujące układy: (a) [131I] bPTH- (1-84), anty-hPTH- (TCA) i hPTH- (1-84) G-100 jako standard; (b) [131I] hPTH- (1-34), anty-hPTH- (1-34) i hPTH- (1-34) w standardzie. W przypadku układu (a) wykryto fragmenty końcowe COOH hPTH- (1-84) o masie cząsteczkowej około 7000 i prawie całkowicie rozróżniono poziomy iPTH w surowicy u pacjentów zdrowych i z nadczynnością tarczycy. Z drugiej strony, w systemie (b) wykryto kilka cząsteczkowych cząsteczek iPTH, w tym składnik większy niż hPTH- (1-84) i inne podobne do hPTH- (1-84) i fragment wymywając z fragment końca NH2 hPTH- (1-34). Gdy testowano oznaczenie stężenia iPTH w surowicy w systemie (b), obserwowano duże nakładanie się poziomów iPTH u osób kontrolnych oraz u pacjentów z pierwotną nadczynnością przytarczyc.
[podobne: wkładki ortopedyczne warszawa, lakiery do paznokci inglot, na czym polega badanie emg ]
[podobne: zdrowe odżywianie prezentacja, lęk przed jazdą samochodem, dawca komórek macierzystych ]